Novinky pro odborníky
Rychlá prenatální diagnostika fenylketonurie pomocí mikrofluidního CD čipu
Nedávno byla představena nová metoda prenatální diagnostiky fenylketonurie (PKU), založená na hybridizaci pomocí CD (kompaktní disk) mikrofluidního čipu. Článek čínských autorů o principu a použití této metody byl uveřejněn v časopise Journal of Chromatography.
Metoda
Nová metoda využívá CD čip, který je složen z polydimetylsiloxanové horní vrstvy (PDMS) obsahující dvanáct DNA hybridizačních mikrokanálů a ze skleněné dolní vrstvy s hydrogelem, na kterém jsou konjugovány jednotlivé DNA oligonukleotidy. K usnadnění rychlé DNA hybridizace je používáno střídavé proudění vyvolávané přerušovanou rotací disku. V průběhu rotace CD čipu je roztok se vzorkem poháněn centrifugálně dovnitř hybridizačních kanálů. Při zastavení CD čipu je vzorek nasáván do hybridizačních kanálů v opačném směru působením kapilárních sil.
Výsledky
Autoři uvádějí, že nová hybridizační metoda byla nejprve validována na kontrolních vzorcích a následně byla použita pro analýzu 30 klinických vzorků od těhotných žen, u jejichž plodů existovalo podezření na možnou PKU. Celý proces DNA hybridizace pomocí CD čipu byl dokončen během 15 minut, přičemž spotřeba vzorku byla pouze 1,5 mikrolitru. Limit detekce DNA byl stanoven na 0,7 ng/µl. Mezi 30 testovanými klinickými vzorky byla ve čtyřech případech detekována mutace V245V, zatímco mutace R243Q byla detekována pouze jednou. Všechny výsledky hybridizace na čipu byly následně potvrzeny také DNA sekvenací.
Podle autorů patří mezi výhody nové metody především rychlost analýzy, jednoduchost provedení a také nízké náklady. Uvedená metoda je spolehlivá, a je proto možné ji využít pro prenatální diagnostiku PKU v suspektních případech.
(vek)
Zdroj: Chen B. et al: Rapid Screening of Phenylketonuria Using a Cd Microfluidic Device. J Chromatogr A. 2011 Apr 8; 1218 (14): 1907–12.
